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出口食品中天然甜味剂甜菊糖苷、甜菊双糖苷、甘草酸、甘草次酸的测定

发布时间：

2022-10-20 11:15

　　甜菊糖苷、甜菊双糖苷（瑞鲍迪甙A）、甘草酸、甘草次酸

　　Stevia sugar、Rebaudioside A、Glycyrrhizic acid、glycyrrhetnic acid

　　【基本信息】

　　甜菊糖苷：甜菊糖（Stevioside）又称甜菊苷，它是从菊科植物（Stevia Rebaudia）该植物在我国称作甜叶菊)的叶子中提取出来的一种糖苷。甜叶菊原产于巴拉圭和巴西，现在中国、新加坡、马来西亚等国家也有种植，其甜味成分由甜菊苷及甜菊A苷、B苷、C苷、D苷和E苷组成。甜菊苷可用水从干叶子中提取、澄清和结晶，实际生产中获得了3种类型，分别是粗提物和纯度为50%及90%的产品。

　　甘草酸：.可用作甜味剂、调味剂、香味增强剂。我国民间惯用于酱及酱制品、腌渍品等。由于具有各种生理活性，具有养发育发的显著效果，可作为头发营养制品及护肤制品的添加剂。在护肤用品中使用可增强其他活性物在防晒、增白、止痒、调理、愈疤方面的疗效。

　　甘草次酸：甘草（Glycyrrhize glabra L.）是常见的药食两用食品·甘草提取物作为天然的甜味剂广泛用于糖果和罐头食品。甘草的甜味来自甘草酸(Glycyrrhizic acid）和甘草次酸（Glycyrrhetinic acid）。前者是一类三萜类皂苷，约占甘草根干重的4%～5%，甜度为蔗糖的50倍·甘草次酸是由甘草酸水解脱去糖酸链而形成,甜度为蔗糖的250倍。甘草次酸具有细胞毒性，长时间大量食用甘草糖（100g/d）可导致严重的高血压和心脏肥大，临床症状表现为钠离子贮留和钾离子的排出，严重者可导致极度虚弱和心室纤颤。

　　【溶液的配制】

　　色谱流动相配制：流动相A：20 mmol/L 磷酸水溶液

　　流动相B：乙腈

　　流动相C：甲醇

　　甜菊糖苷、甜菊双糖苷对照溶液配制：各称取1 mg，用1 mL甲醇溶解，取出少量并稀释至20μg/mL。

　　甘草酸、甘草次酸对照溶液配制：各称取0.5 mg，用1 mL甲醇溶解，取出少量并稀释至10 μg/mL。

　　【分析条件】

　　仪器： Thermo Ultimate 3000

　　色谱柱：TSKgel ODS-100V（4.6 mm I.D.×15 cm，5μm）

　　色谱流动相：流动相A：20 mmol/L 磷酸水溶液

　　流动相B：乙腈

　　流动相C：甲醇

　　洗脱梯度：

时间/min	流动相A/%	流动相B/%	流动相C/%
0	63	34	3
5	60	37	3
8	50	0	50
10	20	0	80
25	10	0	90
28	63	34	3
35	63	34	3

　　流速： 1.0 mL/min

　　柱温： 30℃

　　进样量：10 μL

　　检测器：紫外检测器，210 nm&254nm

　　【分析结果】

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　　图1 甜菊糖苷、甜菊双糖苷色谱图210nm（1 mg/mL）

峰序号	对照品名称	保留时间（min）	不对称因子	分离度	理论塔板数
1	甜菊糖苷	3.752	-	-	7902
2	甜菊双糖苷	3.983	0.92	1.41	9799

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　　图2 甜菊糖苷、甜菊双糖苷色谱图210nm（20 μg/mL）

峰序号	对照品名称	保留时间（min）	不对称因子	分离度	理论塔板数
1	甜菊糖苷	3.722	-	-	8676
2	甜菊双糖苷	3.955	-	1.45	9557

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　　图3 甘草酸、甘草次酸色谱图254nm（0.5 mg/mL）

峰序号	对照品名称	保留时间（min）	不对称因子	分离度	理论塔板数
1	甘草酸	13.017	1.05	-	134529
2	甘草次酸	21.175	1.06	34.84	67364

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　　图4 甘草酸、甘草次酸色谱图254nm（10 μg/mL）

峰序号	对照品名称	保留时间（min）	不对称因子	分离度	理论塔板数
1	甘草酸	13.012	1.05	-	133193
2	甘草次酸	21.177	1.01	35.32	70160

　　结论：TSKgel ODS-100V（4.6 mm I.D.×15 cm，5μm）可以将甜菊糖苷、甜菊双糖苷、甘草酸、甘草次酸分离出来，且甜菊糖苷与甜菊双糖苷的分离度优于检疫标准中所附图谱（见下图附件），且对于标准中所提及的检出限也可以满足，符合出入境检疫标准SN/T3854-2014中的要求。

　　附件：

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