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rPNGase F糖苷酶, 质谱级
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HLS LYS001N
20µg
HLS HAc001Zn
rLys-N 蛋白酶
100µl
说明: 质谱级rLys-N蛋白酶特异性水解在赖氨酸片段的N端的肽键。新的酶切N端的系列蛋白酶
物理形态: 质谱级rLys-N蛋白酶是冻干粉
分子量: 18.4kDa.
溶解液（HLS HAc001Zn）：建议使用rLys-N蛋白酶复在50mM醋酸锌缓冲液中
储存条件：冻干粉末存储在-20℃冰箱，再溶解的酶储存在-20℃或- 80℃。有效期见产品标签
保质期：24月在-80℃
pH 值范围: 在PH7-9 时，rLys-N 具有很好活性
适用范围：rLys-N蛋白酶特异性水解变性后蛋白质K位。
通用溶液酶解法：
rLys-N蛋白酶按照 1:50 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C水浴酶切4小时.
缓冲溶液：50mM碳酸氢铵缓冲溶液或50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)
质量控制｜Quality Control
纯度： 液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度，rLys-N峰强度大于99.5%
专一性：E.coli大肠杆菌样品，ESI-MS/MS质谱分析K端的专一性大于95.0%
活性:500unit/mg; 单位定义：r Lys-N白蛋酶在366nm光密度值半数时，酶切叠氮酪蛋白的单位量，反应条件：37℃保温30min，PH=10
Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用FA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰
LC-MS/MS 质谱分析: 使用rLys-N酶解HSA(人血清白蛋白，纯度99.9%)实验，DTT还原，IAA保护,PH8.0, 37°C恒温酶切4小时,液质Q-E联用
仪 分析，覆盖率80%
所属分类：
华利世蛋白酶
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- 产品描述
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- 商品名称: rPNGase F糖苷酶, 质谱级
- 商品编号: 1032597123582746624
rLys-N蛋白酶, 质谱级<br/> 订货号<br/> 产品名称<br/> 包装<br/> HLS LYS001N<br/> 20µg<br/> HLS HAc001Zn<br/> rLys-N 蛋白酶<br/> 100µl<br/> 说明: 质谱级rLys-N蛋白酶特异性水解在赖氨酸片段的N端的肽键。新的酶切N端的系列蛋白酶<br/> 物理形态: 质谱级rLys-N蛋白酶是冻干粉<br/> 分子量: 18.4kDa.<br/> 溶解液（HLS HAc001Zn）：建议使用rLys-N蛋白酶复在50mM醋酸锌缓冲液中<br/> 储存条件：冻干粉末存储在-20℃冰箱，再溶解的酶储存在-20℃或- 80℃。有效期见产品标签<br/> 保质期：24月在-80℃<br/> pH 值范围: 在PH7-9 时，rLys-N 具有很好活性<br/> 适用范围：rLys-N蛋白酶特异性水解变性后蛋白质K位。<br/> 通用溶液酶解法：<br/> rLys-N蛋白酶按照 1:50 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C水浴酶切4小时.<br/> 缓冲溶液：50mM碳酸氢铵缓冲溶液或50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)<br/> 质量控制｜Quality Control<br/> 纯度： 液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度，rLys-N峰强度大于99.5%<br/> 专一性：E.coli大肠杆菌样品，ESI-MS/MS质谱分析K端的专一性大于95.0%<br/> 活性:500unit/mg; 单位定义：r Lys-N白蛋酶在366nm光密度值半数时，酶切叠氮酪蛋白的单位量，反应条件：37℃保温30min，PH=10<br/> Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用FA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰<br/> LC-MS/MS 质谱分析: 使用rLys-N酶解HSA(人血清白蛋白，纯度99.9%)实验，DTT还原，IAA保护,PH8.0, 37°C恒温酶切4小时,液质Q-E联用<br/> 仪 分析，覆盖率80%
产品信息｜Certificate of Analysiss
rPNGase F糖苷酶, 质谱级
订货号
产品名称
包装
HLS PNG001C
50ul
rPNGase F 蛋白酶
说明: 质谱级PNGase F 糖苷酶特异性水解复杂的糖蛋白的寡糖和高甘露糖链接的天冬酰胺，酶切掉天冬氨酸脱氨基的天冬酰胺,保留低聚糖蛋白
完好无损。但是不会去除低聚糖含有α(1→3)核心岩藻糖。
物理形态: 20mM Tris-HCl(pH 7.5 at 25°C), 50mM NaCl and 5mM EDTA溶液
分子量: 35kDa.
浓度：10unit/ul
储存条件：存储在4-10℃冰箱，禁止-20℃以下低温冷冻
保质期：12月在4℃
pH 范围: PH6.0–10.0 有活性， PH=8.6具有很好活性
适用范围：特异性酶切糖蛋白的 N端寡糖
溶液内酶解SOP:
1.
在 50mM 碳酸氢铵 (pH 7.8)溶液中加入20ug变性的糖蛋白，调整体积至 18µl.
2.
加 2µl rPNGase F溶液
3. 37°C条件下， 保温 1–2 小时酶切糖蛋白样品
活性: 40000unit/min/mg；
单位定义：PNGase F糖苷酶每分钟酶切1.0 umole Ribonuclease B的量，反应条件：37℃，PH=7.5
质量控制｜Quality Control
纯度： 使用Maldi TOF检测杂质蛋白质峰强度，rPNGase F峰峰高比大于99.5%
活性:40000unit/min/mg；单位定义：rPNGase F蛋苷酶每分钟酶切1.0 umole 变性的Ribonuclease B的量，SDS-PAGE分析定量。
Mal
di TOF质谱检测:
变性的RNase B 使
用rPNGase F糖苷酶在37°C酶切60min后，使用
FA基质激光解析质谱分析，可见切糖后的重链蛋白
14.9kDa和轻链蛋白14
.1
kDa质谱峰，未见杂质蛋白信号
,糖蛋白的糖切除完全。
LC-MS/MS 质谱分析: 变性的RNase B经过PNGase F去糖处理,蛋白又使用Trypsin酶切成肽段，质谱鉴定到理论肽段9条，覆盖率67%。
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